Mir338 fI/fI小鼠

• 品系全称：

  C57BL/6-Mir338 ^tm1.1flox

• 小鼠品系：

  C57BL/6J

• 编辑基因：

  Mir338

• NCBI Gene ID：

  723844

• 编辑转录本名称：

  NR_029767.1

• 编辑方式：

  flox

• 基因型：

  纯合

• 小鼠用途：

  探究Mir338在小鼠骨骼发育缺陷方面的作用及其分子机制

Mir338的缺失可部分挽救Runx2单倍体不足导致的颅缝延迟闭合、骨密度降低及侏儒表型，并通过Hif1α-Vegfa通路促进成骨细胞活性1。该品系小鼠通过在Mir338前体两侧插入LoxP位点实现条件性敲除结合组织特异性Cre工具鼠可实现特定细胞谱系特异敲除Mir338。

采用CRISPR/Cas9介导的同源重组策略，通过显微注射将供体DNA(包含两侧精准定位LoxP位点的Mir338基因前体序列)与特异性靶向插入位点的双gRNA-Cas9复合体共同导入受精卵。当Cre重组酶介导LoxP位点特异性切割时，可实现对 Mir338 簇的条件性片段删除。
图1Mir338fl/fl 小鼠的设计、生成和验证。（a）用于 CRISPR-Cas9 介导敲入的两个向导RNA的基因组位置。（b） Mir338flox等位基因。

图2 Mir338fl/fl 小鼠验证。（a）PCR基因鉴定Mir338fl/fl小鼠基因型。(b)取自CKO小鼠的骨髓基质细胞（BMSCs）成骨诱导5天后，qRT-PCR检测Mir338-3p和Mir3065-5p的表达水平。

• 1. Jin R et al. Inhibition of miR338 rescues cleidocranial dysplasia in Runx2 mutant mice partially via the Hif1a-Vegfa axis. Exp Mol Med. 2023
• 55:69-80.