步骤

服务内容

周期

单克隆抗体制备服务

1. 动物免疫

1. 免疫动物，进行2-3次免疫；

4-6周

2. 采集血清，分别做ELISA检测；

3. 提供鉴定报告。

2.杂交瘤制备

效价合格后，经客户同意后，进行融合实验：

1. 选取血清效价高动物的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。

2．有限稀释融合细胞，96孔板克隆化；

3. HAT筛选杂交瘤细胞;

4. 免疫原检测，检测出抗原阳性1-10个阳性细胞，扩大培养至48孔板；

5. 挑取阳性克隆扩增，微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】；

6. 提供客户1ml上清/阳性克隆，供客户检测，检测结果20天内反馈。

客户根据自己的ELISA检测、功能检测结果，挑选阳性克隆；丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆，需要提前沟通，另行约定费用和保存方式。

根据客户的要求，选取阳性克隆进行亚克隆：

1. 每个克隆做96孔板有限稀释培养，ELISA筛选阳性亚克隆；

2. 阳性克隆扩增，少量-80度冻存细胞；

3. 提供1ml杂交瘤细胞上清，供客户进行检测；检测结果请在20天内反馈。

套餐中包括总共不超过3个阳性亚克隆细胞，默认根据结果好的3个阳性亚克隆，放大至T-25 Flask培养，ELISA再次确认后进行细胞冻存，每个亚克隆冻存3管细胞。

4-6周

3.亚克隆

1-3周

4. 腹水制备(可选)

1. 客户选取的杂交瘤细胞制备腹水，免疫2只小鼠，Protein A纯化腹水，ELISA检测效价；

2. 提供纯化后杂交瘤细胞，<5mg/clone；

3. 提供实验报告和剩余腹水抗体；

注：亦可选择细胞上清纯化。

1-3周